DiR小動物活體成像熒光試劑

產(chǎn)品貨號：D2070

存儲條件：?20°C干燥避光

產(chǎn)品名稱: DiR (DiIC18(7)1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)

分子式/分子量: C63H101IN2=1013.4

最大吸收波長/發(fā)射波長: 748/780 nm

推薦濾光片設置：710ex/760em

結構式：

圖 1 。取自脾臟的T細胞用DiR進行熒光染色，然后以5×106個細胞/只小鼠的劑量經(jīng)靜脈注射到Nu/Nu小鼠體內(nèi)。圖中顯示的是注射后24小時用IVIS Spectrum拍攝的圖像，顯示細胞向脾臟遷移。

DiR染料是親脂性的近紅外花菁熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。18個碳的長鏈插入細胞膜中從而對細胞進行染色，而細胞間的染料轉(zhuǎn)移可以忽略不計。DiR的發(fā)射的是近紅外熒光可以穿透細胞和組織，在活體成像中用來示蹤。DIR一般對原代細胞進行熒光染色并可進行活體成像分布觀察，(例如下列細胞embryonic stem cells, bone marrow derived stem cells, adipose derived stem cells, lymphocytes and erythrocytes)

圖2：將25毫克DiR溶解在3毫升乙醇中制備DiR溶液。將199微升的DiR溶液稀釋在5毫升PBS中制備320微克/毫升的工作溶液。從脾臟分離出的T細胞用320微克/毫升的DiR溶液孵育30分鐘。在4℃下以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，形成藍色沉淀。用PBS清洗兩次，然后將5×10^6個細胞通過靜脈注射注入小鼠體內(nèi)。對照組用PBS注射5×10^6個細胞。在注射后10分鐘、1小時、6小時和24小時，用IVIS光譜儀對小鼠進行成像。DiR成像的理想濾光片設置為710納米激發(fā)和760納米發(fā)射。在所有時間點，小鼠均從背部和腹部進行成像。在注射后24小時，將大腦、骨骼、脾臟、肝臟、肺部和腎臟取出進行體外成像。

非侵入性體內(nèi)成像技術能夠?qū)崟r顯示注射入體內(nèi)的T細胞向肝臟和脾臟的歸巢過程，這一過程在體外成像中也得到了證實。