Esp3I 限制性內(nèi)切酶

產(chǎn)品貨號(hào)：F1503S

儲(chǔ)存條件：-20℃

同裂酶：BsmBI, BstGZ53I, Esp16I, Esp23I

注： 同裂酶對(duì)于不同的甲基化修飾可能具有不同敏感性

產(chǎn)品組成

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

LabFD™快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組、能夠在 5~15 分鐘內(nèi)精確完成 DNA 切割的高保真限制性內(nèi)切酶，適用于質(zhì)粒DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組DNA 等的快速酶切。LabFD™快速內(nèi)切酶具有如下特點(diǎn)：5~15 分鐘內(nèi)即可完成酶切；共用一種酶切 Buffer，大大簡(jiǎn)化酶切反應(yīng)體系；良好的酶活冗余度， 輕松應(yīng)對(duì)底物過量或困難模板酶切。此外，LABLEAD去磷酸化、連接試劑在 LabFD™酶切 Buffer 中具有baifenzhibai活性，支持一管化反應(yīng)，提升“酶切-修飾-連接"的體驗(yàn)。

建議反應(yīng)條件

1×LabFD™緩沖液；37℃溫育；參照“DNA 快速酶切流程"配制反應(yīng)體系。

失活條件

80℃溫育 20 min。

功能活性檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下，在 20ul 反應(yīng)體系中，1ulLabFD™ Esp3I 能夠在 15min 內(nèi)*消化 1ug λDNA。

超長(zhǎng)時(shí)間溫育檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下，將 1ul LabFD™ Esp3I 與 1ug λDNA 共同溫育 3h，未檢測(cè)到其他核酸酶污染或星號(hào)活性引起的底物非特異性降解，延時(shí)酶切可能出現(xiàn)星號(hào)活性。

酶切-連接-再酶切檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下，使用 1ul LabFD™ Esp3I 消化底物，回收酶切產(chǎn)物。在 22℃下使用適量 Fast T4 DNA Ligase 可以將酶切產(chǎn)物重新連接。將連接產(chǎn)物再次回收后，使用相同的內(nèi)切酶可以重新切開連接產(chǎn)物。

非特異性內(nèi)切酶活性檢測(cè)

最shi反應(yīng)溫度下，將 1ul LabFD™ Esp3I 與 1ug 超螺旋質(zhì)粒 DNA 共同溫育 4h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，質(zhì)粒 DNA 仍然處于超螺旋狀態(tài)。